尋覓差別表現(xiàn)基因的辦法除開DDRT-PCR以外,還有減雜交(subhybridization,SH)、制約性差減雜交(suppression su變態(tài)ractive hybridiza-tion, SSH)、RNA隨機引物PCR(RNA-arbitrarily primed PCR, RAP-PCR)、代表性差別剖析(representational difference analysis, RDA)、DNA微陣列(DNA Microarray,或DNA芯片)和基因表現(xiàn)系列剖析(serial analysis of gene expression, SAGE)等。據(jù)美國Medline 1999年十二月的調(diào)查,用以上辦法來克隆差別表現(xiàn)基因的文章總計1810篇,那里面有67%是認(rèn)為合適而使用DDRT-PCR技術(shù)[2],由此可見實際上用性和廣泛性。DDRT-PCR的長處可賅括為3SRV(simplicity,sensitivity,speed,reproducibility,versatility)[3]:
①簡單,技術(shù)上僅只有賴PCR和DNA測序膠電泳;
②可以同時候析多組樣品;
③銳敏性高,僅需0.2μg總RNA作為開始材料,可檢出低豐度mRNA;
④實驗周期短,約8d即可完成,易于重復(fù);
⑤最冒尖的長處是實驗過程中可步步證驗比較;
⑥可施行多基因親族的表現(xiàn)剖析。?
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